一，創(chuàng)業(yè)故事。

Viagene創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)的成員都曾經(jīng)是科研一線的科學(xué)家與學(xué)科帶頭人，都是以前發(fā)表文章的共同作者。所有成員所發(fā)表的文章累計(jì)有數(shù)百篇，包括Nnturl，Cells，PNAS，Blood等，從事的領(lǐng)域集中在“細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)”，“胚胎干細(xì)胞”與“iPSC”領(lǐng)域。
團(tuán)隊(duì)之一的R.Y. Liu主要負(fù)責(zé)中國(guó)的業(yè)務(wù)，創(chuàng)業(yè)前在美國(guó)南佛羅里達(dá)州立大學(xué)作教授，發(fā)表過(guò)幾十篇文章，許多文章的IF都在8以上，使用EMSA測(cè)技術(shù)的文章可追溯到22年前（查看）。比較重要的發(fā)現(xiàn)有二條，在HSE EMSA測(cè)定中常見(jiàn)到一種負(fù)調(diào)節(jié)現(xiàn)象，利用固化探針的方法純化該蛋白，發(fā)現(xiàn)了一種新調(diào)節(jié)蛋白 Ku家族，導(dǎo)致了一篇Nature文章與數(shù)篇PNAS的文章。以后與Dr. Richard Jove合作，用EMSA研究白血病STATS轉(zhuǎn)錄因子活性時(shí)，發(fā)現(xiàn)一些白血病細(xì)胞有持續(xù)活化的STAT5，應(yīng)該算是最先報(bào)告該現(xiàn)象。進(jìn)一步研究證明異常活化的STAT5與白血病存活有關(guān)，抑制該轉(zhuǎn)錄因子就會(huì)引起細(xì)胞死亡，為此在所在的美國(guó)大學(xué)申請(qǐng)了4項(xiàng)專(zhuān)利。 Dr. Richard Jove從事 Tyrese Kinase 的研究，是STAT3轉(zhuǎn)錄因子與相關(guān)信號(hào)通路的世界權(quán)威，有興趣的可以到 Pubmed 或 Google 學(xué)術(shù)查一下 關(guān)鍵詞 “Richard Jove”, STAT3"，會(huì)有幾百篇文章出現(xiàn)。團(tuán)隊(duì)的另一成員K.S. Zuckerman是血液病（白血病）相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的權(quán)威。在 Pubmed 或 Google 學(xué)術(shù)查關(guān)鍵詞 “Kenneth Zuckerman”同樣可以查到上百篇文章。

 

科研中時(shí)發(fā)生的一些事件，導(dǎo)致幾位科研合作伙伴走上了創(chuàng)業(yè)之路。

(1) 從事細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)需要做很多WB，需要經(jīng)常跑膠、沖洗感光膠片。由于做WB的人多，帶有膠片沖洗機(jī)的暗室只有一個(gè)，經(jīng)常都要等候。盡管等一等不是問(wèn)題，但膠片沖洗機(jī)常出毛病卻很要命。實(shí)驗(yàn)從準(zhǔn)備細(xì)胞，處理細(xì)胞，準(zhǔn)備樣品，跑膠，轉(zhuǎn)運(yùn)，孵育到顯圖需要1周左右，由于機(jī)器毛病不能出結(jié)果是很令人抓狂。每當(dāng)這時(shí)，相信就會(huì)有人想到是否可以用數(shù)碼像機(jī)代替感光膠片呢？對(duì)于多數(shù)生物科學(xué)家，想想也就罷了，而我們的團(tuán)隊(duì)卻有相應(yīng)知識(shí)與能力做相應(yīng)的開(kāi)發(fā)嘗試。1998年前，成像儀包括Bio-Rad和Alpha Innotech的成像儀都只能用于照DNA圖，儀器暗箱不避光，不能用于化學(xué)發(fā)光。我們當(dāng)時(shí)用膠合板做了一個(gè)完全避光的暗箱，采用了Cohu公司的致冷CCD與Scion公司的工業(yè)采集卡，做成了一個(gè)化學(xué)發(fā)光成像儀，效果非常不錯(cuò)，該暗箱現(xiàn)在還能使用。

(2) 另一方面，研究細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)需要做很多EMSA，幾乎天天與放射性同位素打交道。雖然創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)成員當(dāng)時(shí)都已不做具體操作，但實(shí)驗(yàn)操作員卻叫苦連天。在試驗(yàn)臺(tái)數(shù)米遠(yuǎn)，甚至實(shí)驗(yàn)室門(mén)口就能用閃爍計(jì)測(cè)出很強(qiáng)聲響。當(dāng)時(shí)就想過(guò)改用非同位素探針做EMSA，曾試過(guò)Roche公司的地高辛標(biāo)記，但沒(méi)有成功。主要是用地高辛標(biāo)記出來(lái)的探針的比活性達(dá)不到要求，后面的EMSA沒(méi)法做。也試過(guò)文獻(xiàn)報(bào)道的FITS與FAM標(biāo)記探針的方法，但熒光探針靈敏度低，無(wú)法替代放射性探針。后來(lái)發(fā)生過(guò)一次大面積放射性污染導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)樓關(guān)閉兩周，使我們不得不認(rèn)真考慮非放射性EMSA。幾個(gè)月后，終于把用生物素標(biāo)記探針的EMSA做到能看到帶譜，但存在信號(hào)弱以及與放射性EMSA圖不一致的問(wèn)題，當(dāng)時(shí)百思不得其解，幾個(gè)月后才發(fā)現(xiàn)是非放射性探針引起的問(wèn)題。期間Pierce公司上市了基于化學(xué)發(fā)光的的EMSA試劑（Light- Shift）。由于Light-Shift不帶探針，我們自己合成了生物素標(biāo)記的NFkB探針。Light-Shift不帶轉(zhuǎn)運(yùn)膜，我們需要另外購(gòu)買(mǎi)尼龍膜。但EMSA的NFkB信號(hào)還是很弱，圖譜也與32P標(biāo)記探針的EMSA不一致。由于Light-Shift沒(méi)有給出任何轉(zhuǎn)錄因子的反應(yīng)條件，我們把Kit所帶的KCl，NP-40，甘油，MgCl2，EDTA等都測(cè)試過(guò)，沒(méi)有獲得好結(jié)果。后來(lái)Pierce的技術(shù)把自己用的生物素NFkB探針給我們對(duì)照，但即使用Pierce的探針，結(jié)果也很不理想（我們至今還保留有Pierce的往來(lái)郵件）。后來(lái)，經(jīng)過(guò)不斷的測(cè)試與對(duì)比，我們找到了引起非放射性EMSA信號(hào)弱和與放射性EMSA結(jié)果不一致的問(wèn)題。但許多生物公司與許多實(shí)驗(yàn)室并不了解這個(gè)問(wèn)題。

(3) 同時(shí)期，我們還有幾項(xiàng)有商業(yè)價(jià)值的革新性技術(shù)（查看）

由于WB的應(yīng)用非常普遍，用化學(xué)發(fā)光成像儀代替感光膠片可能有好的市場(chǎng)前景。EMSA是測(cè)定轉(zhuǎn)錄因子活性的金指標(biāo)，具有不可替代性，非放射性EMSA應(yīng)該有一定的商業(yè)價(jià)值，加上我們的另外幾項(xiàng)發(fā)明與改革，幾位曾經(jīng)的文章共署名人各自出了部份資金，2005年創(chuàng)立了微奧基因 Biotech。同年年中在寧波保稅區(qū)成立唯奧基因中國(guó)公司，2006年EMSA試劑盒，化學(xué)發(fā)光成像儀等產(chǎn)品陸續(xù)上市。

二，品牌故事

微奧基因是原創(chuàng)開(kāi)發(fā)公司，在產(chǎn)品與技術(shù)開(kāi)發(fā)方面做過(guò)以下努力。

（1） 開(kāi)創(chuàng)自己的品牌與商標(biāo)。在美國(guó)商業(yè)環(huán)境下，生物公司基本都是自己做銷(xiāo)售，并不經(jīng)過(guò)經(jīng)銷(xiāo)商的環(huán)節(jié)。微奧基因要生存就需要有自己的品牌，為此，微奧基因 采用了一系列商品名（一些也在國(guó)內(nèi)注冊(cè)）；Cool-Imager（化學(xué)發(fā)光成像儀），Non-Radioactive EMSA (nrEMSA)，Lumigel(實(shí)時(shí)凝膠電泳系統(tǒng))，TransEZ（快速細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑），CoolStar（非EB RNA/DNA染色劑），Lightgen（化學(xué)發(fā)光底物），Coolblue（藍(lán)光透射儀）等。

（2） 產(chǎn)品有自己的特質(zhì)。如果微奧基因開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品以技術(shù)與著名大公司雷同就將很難生存。因而，微奧基因的主要產(chǎn)品都有其鮮明的特性，下面為一些主要產(chǎn)品的特性：

1) 時(shí)到如今，許多使用Bio-RAD或Alpha Innotech化學(xué)發(fā)光成像儀的公司，仍然還在使用感光膠片獲取WB圖像，因?yàn)槌上駜x的靈敏度不夠。微奧基因的成像儀有極高的靈敏度，可以完全代替感光膠片。將微奧基因的成像儀（Cool-Imager）與Bio-RAD或Alpha Innotech化學(xué)發(fā)光成像儀進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)比較，用同一張膜，Cool-Imager的靈敏度要高很多，可以完全代替感光膠片。實(shí)際上，微奧基因所從事的非放射性EMSA與非放射性分子雜交技術(shù)服務(wù)一直都使用Cool-Imager，從來(lái)沒(méi)有出現(xiàn)看不到圖的情況。

2) 因?yàn)槲覀儽旧砭褪荅CL成像儀的生產(chǎn)廠商，能夠輕易對(duì)各種ECL產(chǎn)品進(jìn)行比較，能夠?qū)CL原料進(jìn)行篩選，找出靈敏度高與穩(wěn)定性好的的ECL成分。我們的實(shí)驗(yàn)室一天就能完成幾百樣品的測(cè)定與比對(duì)。我們測(cè)試比較過(guò)國(guó)內(nèi)外的許多廠家的ECL產(chǎn)品，包括國(guó)外的GE，Pierce，Bio-Rad，Li-Cor，Lumigen，以及國(guó)內(nèi)的碧..天, San..gon的產(chǎn)品。我們的用于感光膠片ECL底物（LightgenCL）性能與Pierce的Pico與Dura相當(dāng)，比GE的同等產(chǎn)品強(qiáng)，價(jià)格卻只有1/4左右。相對(duì)而言，國(guó)內(nèi)一些ECL產(chǎn)品并沒(méi)有經(jīng)過(guò)測(cè)試比較，所宣稱(chēng)的ECL靈敏度與穩(wěn)定性只是傳說(shuō)。我們?cè)?jīng)把碧..天的ECL底物進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果慘不忍睹：靈敏度不高，而且與HRP濃度沒(méi)有線性關(guān)系。我們向有關(guān)廠家反應(yīng)過(guò)問(wèn)題，對(duì)方也承認(rèn)靈敏度問(wèn)題，我們有來(lái)往郵件，歡迎索取。

3) 由于我們創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)對(duì)EMSA有豐富經(jīng)驗(yàn)，能夠準(zhǔn)確確定轉(zhuǎn)錄因子的EMSA結(jié)合條件。因而，我們認(rèn)為沒(méi)有必要讓客戶(hù)自己摸索測(cè)定條件。微奧基因的所有EMSA成套試劑都包括標(biāo)記探針，反應(yīng)液，測(cè)定液，轉(zhuǎn)運(yùn)膜，ECL底物與詳細(xì)的操作說(shuō)明書(shū)。試劑的EMSA測(cè)定的條件都已經(jīng)確定，客戶(hù)照說(shuō)明書(shū)做就行了， 做出來(lái)的圖也非常漂亮。第2圖為我們最近為客戶(hù)做的NFkB測(cè)定圖譜，其中就一條清楚的NFkB帶，能夠與非標(biāo)記探針產(chǎn)生明顯競(jìng)爭(zhēng)（第5-6道），突變探針對(duì)該結(jié)合帶沒(méi)有影響（道7-8）。相比之下，Pierce的圖有一大堆條帶（查看廠家的效果圖），要找出那一條是NFkB并不容易。同樣的，我們開(kāi)發(fā)的近紅外EMSA測(cè)定效果（第3圖）比別的廠家也有顯著提高（ 查看廠家效果圖）。需要注意的是該廠家的NFkB測(cè)定需要使用4-12%梯度膠，而我們的EMSA是在普通6%膠，跑40分鐘就可完成，效果還更好。用微奧基因的產(chǎn)品與技術(shù)，能夠做出漂亮的RNA EMSA圖譜（第4圖）。

4) 與用放射性同位素標(biāo)記探針的EMSA進(jìn)行比較，我們發(fā)現(xiàn)網(wǎng)上列出的EMSA探針序列基本上都是用于32P標(biāo)記探針的。由于用于非放射性EMSA的生物素標(biāo)記探針或熒光標(biāo)記探針與32P標(biāo)記探針有很大不同，直接將網(wǎng)上找到的放射性探針序列用于非放射性EMSA會(huì)引起很大問(wèn)題（查看），微奧基因有一套對(duì)探針進(jìn)行非放射性標(biāo)記的技術(shù)與程序，我們的標(biāo)記技術(shù)的優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)為； 1）EMSA測(cè)定信號(hào)強(qiáng)，2）結(jié)果與放射性EMSA可比性高，3）價(jià)格實(shí)惠，例如用近紅熒光標(biāo)記探針的價(jià)格，價(jià)格僅僅相當(dāng)于合成公司的1/2-1/3。已標(biāo)記的生物素價(jià)格價(jià)格更低至550元（購(gòu)試劑時(shí)的優(yōu)惠價(jià)）。

5) 微奧基因的研發(fā)團(tuán)隊(duì)對(duì)產(chǎn)品與技術(shù)精益求精，產(chǎn)品由最初的5種增加到數(shù)百種。測(cè)定技術(shù)由最初的一類(lèi)增加到三類(lèi)。測(cè)定時(shí)間由最初的7小時(shí)可以縮短到2小時(shí)左右，操作步驟由原來(lái)的10多步操作精簡(jiǎn)到2-3步。已標(biāo)記探針的價(jià)格減少了一倍，探針定制由原來(lái)2200元一對(duì)減少到550元（訂購(gòu)試劑時(shí)的優(yōu)惠價(jià)）。相比之下，Roche與Pierce的EMSA試劑在10年前投放市場(chǎng)，基本沒(méi)有什么改進(jìn)；不管是使用Roche的還是Pierce的產(chǎn)品，都還要求客戶(hù)自己標(biāo)記探針并做比活性測(cè)定，與TF的結(jié)合條件至今仍然還要客戶(hù)自己摸索。

（3） 產(chǎn)品針對(duì)性強(qiáng)

1) 微奧基因的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)有相當(dāng)?shù)尼槍?duì)性。開(kāi)發(fā)的動(dòng)力是為解決在實(shí)驗(yàn)工作中遇到的實(shí)際困難：如ECL成像，非EB染色，非放射性EMSA，快速細(xì)胞轉(zhuǎn)染與非放射性分子雜交等。

2) 一些產(chǎn)品是因?yàn)榭蛻?hù)反應(yīng)的問(wèn)題或普遍存在的問(wèn)題。我們?cè)陂_(kāi)始時(shí)并沒(méi)有打算開(kāi)發(fā)核蛋白提取試劑。但后來(lái)，多次發(fā)現(xiàn)客戶(hù)提取的核蛋白出現(xiàn)了降解，有幾位開(kāi)發(fā)自己配置試劑時(shí)出錯(cuò)，我們就把我們實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期使用的核蛋白提取的配方做成了產(chǎn)品，因?yàn)槲覀兊脑噭膩?lái)沒(méi)有出現(xiàn)過(guò)降解問(wèn)題。后來(lái)的事實(shí)也證明我們的核蛋白提取試劑確實(shí)為客戶(hù)帶來(lái)方便，甚至一些使用別的公司的產(chǎn)品導(dǎo)致EMSA測(cè)定失敗的客戶(hù)使用我們的產(chǎn)品后獲得成功。

3) 一些試劑是我們發(fā)現(xiàn)市場(chǎng)現(xiàn)有產(chǎn)品有些問(wèn)題存在。典型的例子是市場(chǎng)上的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑與EGTA不兼容問(wèn)題。EGTA是核蛋白提取的重要成分，但會(huì)會(huì)造成BCA試劑變色，造成蛋白濃度測(cè)定虛高。造成EMSA測(cè)定無(wú)信號(hào)或信號(hào)弱。

4) 一些產(chǎn)品是因?yàn)閲?guó)內(nèi)廠家宣稱(chēng)的產(chǎn)品名不符實(shí)，典型的例子是ECL底物。由于市場(chǎng)上ECL比較多，我們開(kāi)始并沒(méi)有打算開(kāi)發(fā)ECL產(chǎn)品。但測(cè)試的國(guó)內(nèi)產(chǎn)品效果很不好，最要命的是與HRP濃度不成線性關(guān)系，無(wú)法用于我們的EMSA測(cè)定。我們自主開(kāi)發(fā)的ECL產(chǎn)品已經(jīng)很好解決了靈敏度與酶線性關(guān)系問(wèn)題，國(guó)內(nèi)外用戶(hù)反應(yīng)良好。重要的是我們提供免費(fèi)樣品供測(cè)試比較。

（4）產(chǎn)品接受客戶(hù)與市場(chǎng)檢驗(yàn)。

微奧基因的自創(chuàng)產(chǎn)品在上市初期，都提供免費(fèi)樣品或讓用戶(hù)免費(fèi)使用。時(shí)至今日，微奧基因的產(chǎn)品贏得了國(guó)內(nèi)外無(wú)數(shù)客戶(hù)的認(rèn)可；美國(guó)客戶(hù)包括Eli Lilly公司，BD公司已經(jīng)許多知名大學(xué)與研究院所,國(guó)內(nèi)的客戶(hù)包括國(guó)內(nèi)絕大多數(shù)的大學(xué)與研究院所。2005年推出EMSA試劑與技術(shù)服務(wù)時(shí)，國(guó)內(nèi)技術(shù)服務(wù)的第一個(gè)客戶(hù)是廣東湛江醫(yī)學(xué)院的陶靜莉老師，因?yàn)楫?dāng)?shù)馗杀缓酶悖绽蠋熓怯靡粋€(gè)小液氮罐通過(guò)陸運(yùn)寄給我們的。做完實(shí)驗(yàn)后我們?cè)侔压拮蛹幕亟o她。樣品是大鼠腎臟，結(jié)果很漂亮。在產(chǎn)品推出早期，我公司甚至為到我公司進(jìn)行EMSA實(shí)驗(yàn)客戶(hù)提供免費(fèi)吃、住。先后有哈爾濱醫(yī)科大學(xué)的胡老師,浙江中醫(yī)藥大學(xué)的馬老師，北京天壇醫(yī)院神內(nèi)科的薛教授，寧波大學(xué)的魏老師，南通大學(xué)的徐老師，廈門(mén)醫(yī)科大學(xué)的羅老師等帶組織或細(xì)胞到我公司進(jìn)行做NFKB EMSA測(cè)定，都獲得預(yù)期的結(jié)果。經(jīng)過(guò)多年的耕耘，Vingent公司的產(chǎn)品已被越來(lái)越多的客戶(hù)所接受。客戶(hù)可以在論壇上看到有用Pierce產(chǎn)品或用碧..天產(chǎn)品做不出結(jié)果的報(bào)道，但沒(méi)有微奧基因產(chǎn)品不工作的報(bào)道。

我們已經(jīng)服務(wù)過(guò)數(shù)百個(gè)客戶(hù)，測(cè)定過(guò)成千上萬(wàn)的樣品。到2015年年初，客戶(hù)已經(jīng)發(fā)表了200多篇文章。