EMSA-NFkB
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2. 微奧基因非放射性 EMSA產品信息:
微奧基因擁有多項關于EMSA的獨特技術。非放射性EMSA及其相關產品是微奧基因在全球推出的很成熟的產品之一。EMSA產品特性;
微奧基因的EMSA成套試劑包括探針、轉運膜、化學發光底物等所有試劑，到貨后即可以進行EMSA測定。客戶不需要花時間合成與標記探針或購買其它試劑。
微奧基因出售的所有EMSA產品都經過測試，保證出結果。
微奧基因有專人負責EMSA產品配置并經過檢測，出錯的可能很小。
微奧基因唯一一家具有各種針對特定TF的陰性與陽性對照。是我們有條件進行實際EMSA測試。
由于每種產品都做過實驗測定，測定條件也已經確定，用戶不需要 花時間自己摸索實驗條件。
有中文與英文操作手冊供用戶選擇。
EMSA技術支持
盡管注意到了以上的問題，有時候還是沒有拿到理想的結果。對于可能出現的問題，用戶需要能夠發現問題，找出解決辦法。如何客戶愿意找我們共同分析，我們也會通過力所能及的幫助。現在使用我們的產品與服務單位比較多。許多出現問題的用戶，在我們的幫助下，都拿到了理想結果，許多并已經發表了文章。相信 陸續會有許多文章發表。
我們能夠回答有關EMSA實驗的所有問題。歡迎來電與我們洽詢 。
我們的技術人員對EMSA非常熟悉，知道怎么分析結果，能夠解決EMSA測定中的有關的問題。
如果你在北京或上海，我們的專家可以上門通過協助用戶的實驗。
我們提供EMSA技術服務以展示微奧基因對所開發的EMSA技術的信心。
用戶的反饋
網上可以查到買其它公司的EMSA產品 做不出結果的求助信息，但基本查不到用微奧基因產品做不出結果的記錄 。
使用微奧基因產品與服務的客戶滿意度為99％以上。
微奧基因公司的客戶很多， 我們在此列出了一部分。歡迎客戶來電了解更多情況。
已有200多篇文章發表（查看）。
? NF-кB EMSA Kit [Cat# TFDET001]
4－1，非放射性NF-kB試劑盒[目錄號：TFDET001]
NF-kB最初被鑒定為在B細胞中和免疫球蛋白k輕鏈的增強子結合。但隨后在非B-細胞的細胞質中被發現，形成NF-kB和IkB的復合物。最初在DNA結合蛋白復合物中分離的NF-kB是由p65(RelA)和p50構成的異源雙聚體。其他分離的單體包括p49（也可稱為p52），p75(c-Rel),p68(RelB)。p65，p68，p75單體起反式激活作用。
p50，p49(p52)單體具有DNA結合活力，但只具有微量的反式激活作用。據報道p49和NF-kB的單體p65形成具有轉錄活力的異源雙體，類似于p50/
p65異源雙體。p49/ p65和p50/
p65異源雙體在細胞質中受一種叫IkBa/MAD-3的抑制劑調節。IkB和p65單體結合，阻制了細胞核中的定位和DNA的結合。
在體外高濃度的p65能形成同源雙聚體，能和DNA微弱地結合。Poly(dI:dC)能抑制這一反應(14)。p49和p50也能形成同源雙聚體，但在細胞中的濃度很低。
通常，在作NF-kB的凝膠遷移實驗時，在20ul的反應體積中，有溶于10 mM HEPES的0.28pmoles
的NF-kB9寡核苷酸(pH7.9), 50mMKCl, 0.2mMEDTA, 2.5mM DTT, 10%甘油,
0.05%NP-40。
當用純化的蛋白時，250-300ng足以形成凝膠遷移復合物，而需用10ug的HeLa細胞核抽提物。凝膠遷移復合物在室溫中保溫30分鐘，在50mMTris(pH8.3)和38mM甘氨酸的7%聚丙烯酰胺凝膠電泳中分離凝膠遷移復合物。含考馬斯蘭和二甲苯藍色素的加樣溶液只能加入到陰性對照反應中，因這兩種色素會加劇NF-kB復合物的解離。
當用HeLa細胞核抽提物作為結合蛋白來源時，可形成兩種序列特異的凝膠遷移復合物，即p50/p50同源雙聚體和p50/
p65異源雙聚體。在表達p49，p50，p65的細胞中，可檢測到4個序列特異的凝膠遷移復合物(p49/ p49，p50/
p50，p50/ p65，p49/ p65)，如果存在高濃度的p65，可檢測到微量的p65/p65。
下列試劑可加強NF-kB在體外的結合：mM級的GTP，ATP，精胺，亞精胺，鋇或鈣離子，ng級的Co3+(NH3)6。
參考資料：
Urban M B et al 1991 EMBO J 10(7), 1817
Baeuerle P A 1991 Biochim Biophys Acta 1071, 63
4－2，非放射性STAT5試劑盒[目錄號：TFDET004]
4－2，非放射性STAT5試劑盒[目錄號：TFDET004]
STAT(Signal Transducer and Activator of Transcription)5
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信號轉導和轉錄激活因子5，屬STAT蛋白家族，是一種tyrosine磷酸化轉錄因子，羧基端少數氨基酸序列不同。有STAT5A和STAT5B兩種亞型，具有95％的同源性。
STAT5的活化與腫瘤的發生關系密切，有文獻報道ALL（急性淋巴細胞白血病）、AML（急性髓細胞白血病）等白血病有JAKs，Stat1、3、5的活化，ALL以Stat5活化為主，在Stat5活化的AML病例中，有部分只有STAT5B活化而無Stat5A活化。另外，在各種人固體瘤和血液惡性瘤中，STAT蛋白（尤其是STAT3和STAT5）經常被過度活化。持續的STAT3和STAT5信號系統連續的反調控核基因的表達，促進了腫瘤細胞的生長和生存，常常導致惡性腫瘤的發生。因此，可將STAT蛋白家族做為腫瘤治療的理想靶點，研究它們參與整個腫瘤細胞生長過程的調控機制，分析它們在細胞中的活化和抑制過程，為腫瘤的治療提供新思路。
STAT5在細胞中的信號轉導主要通過JAK（JAK酪氨酸蛋白激酶）/STATs信號途徑完成，STAT5通常位于胞漿中。當細胞因子與相應受體結合，激活與受體相聯的JAK激酶磷酸化（免疫沉淀法實驗證實在用GM-CSF處理后僅JAK2的酪氨酸被磷酸化）。磷酸化的JAK激酶使STAT5單體磷酸化，被磷酸化的STAT5單體與受體分離并與已經活化的其他STATs蛋白形成同源或異源二聚體，二聚體轉移到細胞核與相應的DNA結合并激活轉錄。從激活酶動力學角度講，STAT5被細胞因子激活后用STAT5抗體可檢測到2個條帶，上方一條是與細胞因子刺激無關的組成性酪氨酸磷酸化，下面一條被激活的是STAT5B，在1 min內被磷酸化，并隨蛋白質的磷酸化的不同而遷移。有實驗表明STAT5A比STAT5B更易于激活。
參考資料：
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Imada K,Leonard W J.The JAK-STAT pathway, J. Mol Immunol, 2000, 37:1-11
Magrassi L,De Fraja C,Conti L,et al.Expression of the JAK and STAT superfamilies in human meningiomas, J. Neurosurg, 1999,91:440-446.
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